Главная

Категории:

ДомЗдоровьеЗоологияИнформатикаИскусствоИскусствоКомпьютерыКулинарияМаркетингМатематикаМедицинаМенеджментОбразованиеПедагогикаПитомцыПрограммированиеПроизводствоПромышленностьПсихологияРазноеРелигияСоциологияСпортСтатистикаТранспортФизикаФилософияФинансыХимияХоббиЭкологияЭкономикаЭлектроника






Фенольных соединений методом ТСХ


Цель работы:провести идентификацию фенольных соединений А и В в смеси, определить на хроматограмме величины RfА и RfВ, степени их разделения Rs и числа теоретических тарелок NА и NВ.

Оборудование:разделительная камера или цилиндр с притёртой крышкой, капилляры, пластины марки «Sorbfil» или «Силуфол» с УФ-индикатором ПТСХ-АФ-В-УФ или ПТСХ-П-В-УФ или без УФ-индикатора, хроматографическая камера, сушильный шкаф либо промышленный сушильный пистолет. Элюент: смесь вода – пропан-2-ол – 25% водный раствор аммиака (1 : 8 : 1). Для определения положения пятен анализируемых веществ после хроматографирования применяется УФ-облучатель УФС-254/365, камера с парами йода, раствор КMnO4 , 5% спиртовой раствор фосфорномолибденовой кислоты.

Выполнение работы. Анализируемыми объектами в данной работе являются фенольные соединения. Они широко встречаются в составе как промышленных, так и продовольственных товаров. За счет своей способности проявлять антиоксидантный эффект фенолы используют в качестве стабилизаторов продуктов питания для увеличения их срока хранения. В промышленности фенольные соединения также широко применяют при изготовлении лакокрасочных покрытий для предотвращения окислительных и деструктивных процессов при хранении и эксплуатации. В связи с этим идентификация фенольных соединений в различных объектах является актуальной задачей в современном промышленном и продовольственном производстве.

Подготовка хроматографической пластины. Вырезают пластину размером 12×5 см. Снизу на расстоянии 0,5 - 1 см от нижнего края пластины карандашом проводят стартовую линию. На таком же расстоянии от левого края отмечают первую точку для нанесения пробы, расстояние между пробами на хроматограмме должно быть около 1 см.

Хроматографирование. Пластинку для ТСХ следует брать аккуратно за края, не захватывая при этом её центральную часть!

Нанесение образца на пластинку для ТСХ. На линию старта с помощью специально приготовленного капилляра наносят анализируемый раствор и растворы стандартных веществ. При этом необходимо прижать капилляр к слою сорбента; раствор следует наносить так, чтобы капля не расплывалась (чем меньше диаметр капли, тем более четкой будет хроматограмма). Для более интенсивного испарения растворителя на нанесенные пробы можно направить поток воздуха комнатной температуры. Диаметр пятна не должен превышать 2-3 мм, а расстояние между пятнами должно быть не менее 7 мм. Пятно можно обвести карандашом (ни в коем случае в этих целях нельзя использовать гелевую или шариковую ручку!).

Получение хроматограммы.После полного высушивания пластинку помещают в камеру с плоским дном для восходящего элюирования, в которой залита элюирующая система. Нижний край хроматограммы опускают в растворитель на 2-3 мм. Пятно не должно погружаться в растворитель, а пластинка не должна касаться стенок цилиндра. Элюирование прекращают в момент, когда линия фронта не доходит до края пластины 2-7 мм. Время хроматографирования составляет несколько минут. После этого пластинку вынимают, отмечают на ней положение фронта растворителя и высушивают в токе сухого воздуха. Измеряют расстояние между стартовой линией и фронтом растворителя L. Затем по табличным значениям Rf и экспериментально найденной величине Lвычисляют l- высоту подъема зоны каждого фенола из заданной комбинации. Вычисляют величины Rsи α для двух фенолов разделяемой смеси (рис. 6.1) по формулам 6.5 и 6.6 соответственно. Делают вывод о качественном составе анализируемой смеси и селективности разделения фенолов.

Проявление. Обнаружение фенолов.Большинство органических веществ образует невидимые зоны, поэтому для их обнаружения хроматограмму обрабатывают растворами органических и неорганических реагентов-проявителей (таблица 2.1).

После высушивания пластинки ТСХ проявление пятен фенолов осуществляют с помощью УФ-лампы либо с помощью опрыскивания раствором перманганата калия. Пятна коричневого цвета также проявляются при взаимодействии с парами йода в чашке Петри или в сосуде со смесью силикагеля и йода. Проявление фосфорномолибденовой кислотой проводят путем опускания пластинки в спиртовой раствор реагента с последующим высушиванием и прогреванием в токе горячего воздуха до появления окрашенных пятен.

Идентификация.Качественный состав смеси фенольных соединений в анализируемом растворе устанавливают, сопоставляя положение на хроматограмме окрашенных пятен стандартных образцов и анализируемой смеси. Для большей точности определения рассчитывают коэффициент подвижности Rfдля стандартных образцов и анализируемой смеси в данной элюирующей системе. Результаты заносят в таблицу 2.2. Сопоставляя значения Rf(приведенные в таблице 2.3) для соответствующих соединений, делают вывод о наличии тех или иных компонентов в анализируемой пробе.

 

Таблица 2.2.

Селективность разделения методом ТСХ смеси фенолов

 

Номер пробы Значение коэффициента подвижности Параметры эффективности хроматографического разделения Название соединения
Rf стандарта табличный Rf стандарта Rf компонента смеси l, мм а, мм N H, мм α  
1.                  
                 
6.                  
Rs = Dl / (a(A) / 2 + a(B) / 2) = 2Dl / (a(A)+ a(B))

 

Таблица 2.3.

Коэффициенты хроматографической подвижности Rf фенолов на пластинках

для ТСХ «Силуфол» в системе вода (1) – пропан-2-ол (8) – NH3 конц. (1).

 

Соединение Коэффициент Rf Соединение Коэффициент Rf
Гваякол 0,23 Синаповая кислота 0,32
Феруловая кислота 0,17 п-Крезол 0,90
Резорцин 0,75 Ванилин 0,57
1-Нафтол 0,78 Эвгенол 0,15
Фенол 0,85 Пирогаллол 0,35
Галловая кислота 0,10 Пирокатехин 0,20
Кумаровая кислота 0,22    


Последнее изменение этой страницы: 2016-07-23

headinsider.info. Все права принадлежат авторам данных материалов.